苞叶香茶菜庚素诱导人白血病细胞系HL-60凋亡的分子机制研究

目的：观察苞叶香茶菜庚素（melissoidesin G，MOG）对多种肿瘤细胞系的细胞毒活性，并研究MOG诱导白血病细胞系HL．60凋亡的相关分子机制。方法：用MTT法评价化合物对多种肿瘤细胞的增殖抑制活性；通过流式细胞术PI单染法观察化合物对肿瘤细胞内DNA含量的影响，以分析周期变化；Annexin V染色法分析凋亡；荧光底物发光法检测caspase活性；膜电位依赖性结合的荧光探针JC-1标记法检测线粒体膜电位（△ⅢIn）；Western blotting检测蛋白表达。结果：（1）MOG对多种肿瘤细胞系均有一定的增殖抑制作用；（2）MOG诱导HL-60细胞发生剂量依赖性凋亡；（3）在MOG作用下，HL-60细胞出现时间依赖性的△ψm降低；（4）HL-60细胞在MOG作用6～12h后caspase-3和caspase-7均被明显激活，且在抑制剂Z-VAD-FMK的作用下，MOG诱导的caspase激活和细胞凋亡被完全抑制；（5）抗氧化剂NAC可以抑制MOG诱导的△ψm降低、细胞凋亡及caspase-3激活。结论：MOG能够明显抑制肿瘤细胞增殖，并通过诱导细胞凋亡发挥其抗肿瘤作用。推测MOG可能通过引起细胞内氧化还原状态失平衡，进一步破坏线粒体功能，并激活caspase通路引起肿瘤细胞凋亡。

完成机构：军事医学科学院附属医院药学部,北京100071