表没食子儿茶素没食子酸酯对张氏肝细胞DNA修复基因表达的影响

采用MTT法、Comet assay（彗星实验）和RT-PCR法研究了表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对DNA损伤剂卡莫司汀作用后张氏肝细胞的DNA损伤及相关修复基因表达的影响。结果表明：EGCG能阻止卡莫司汀所致张氏肝细胞的生长抑制，卡莫司汀单用对张氏肝细胞的IC50为43．31μg／mL，当用25μg／mL和50μg／mL的EGCG与卡莫司汀联用时，对张氏肝细胞的IC50分别提高至52．46μg／mL和46．65μg／mL。彗星分析结果表明，EGCG还能减小卡莫司汀引起的张氏肝细胞DNA损伤，彗星Olive尾矩值由单用时的9．07±5．48降为联用时的6．02±2．46。EGCG还能使卡莫司汀所致张氏肝细胞的DNA修复基因mgmt和alkb的表达下降得到回升，卡莫司汀（20μg／mL）处理张氏肝细胞24h后，mgmt和alkb的mRNA水平（与外参0634-actin的比值）比未处理组明显下降（分别由0．451±0．041和0．356±0．120下降至0．323±0．046和0．046±0．017，p〈0．05或p〈0．01），当EGCG与卡莫司汀联合处理24h后，二者的mRNA水平基本恢复到正常（p〉0．05），与外参β-actin的比值分别为0．451±0．041和0．451±0．041。说明EGCG能保护卡莫司汀对正常肝细胞的DNA损伤，因为它能逆转卡莫司汀所致正常肝细胞内DNA修复酶基因mgmt和alkb的表达下降。

完成机构：[1]电子科技大学生命科学与技术学院分子生物学实验室,610051 [2]成都恩威集团四川恩威中医药研究开发有限公司药理室