小剂量茶碱对大鼠气道上皮细胞NF—kB活性的影响

目的：观察小剂量茶碱是否对体外培养的哮喘模型大鼠气道上皮细胞中NF-kB的活性存在影响。以进一步阐明茶碱类药物抗炎作用和免疫调节作用的机制。方法：雄性Wistar大鼠随机分为2组，对照组(5只)，哮喘模型组(15只)；模型组以卵清蛋白致敏和激发，建立哮喘模型。体外培养哮喘模型组和对照组大鼠的气道上皮细胞。分别观察加入脂多糖(LPS)刺激前后NF-kB活性的变化；在哮喘模型组大鼠的气道上皮细胞中加入不同浓度的氨茶碱与LPS(1μg.ml^-1)共同培养4h后，以及加入同一浓度氨茶碱和LPS(1μg.ml^-1)共同培养不同时间后NF-kB活性的变化。NF-kB活性采用免疫组织化学方法检测，以细胞核染色作为阳性标准，以细胞核阳性的百分比表示NF-kB的活性。结果：经LPS刺激前，对照组和哮喘组大鼠气道上皮细胞胞浆NF-kB均有一定程度的表达。细胞核表达的细胞，哮喘组为(6．4％±1．2)％，而对照组为(4．7％±1．7)％，二者相比较，其差异具有统计学意义(P<0．05)。经1μg.ml^-1脂多糖刺激2h后，两组细胞胞核NF-kB表达均明显上升，哮喘组为(82．5±5．2)％，对照组为(79．3±3．4)％，两者相比，无统计学差异(P>0．05)。在哮喘组大鼠上皮细胞中加入lμg.ml^-1脂多糖及各种浓度氨茶碱共同培养4h后，NF-kB活性均有所下降。0μg.ml^-1(不加茶碱)组，5μg.ml^-1组，10μg.ml^-1组，15μg.ml^-1组NF-kB活性分别为(84．3±3．2)％，(82．8±2．5)％，(78．4±6．3)％，(75．6±4．1)％。除5μg.ml^-1组与0μg.ml^-1(不加茶碱处理)组之间的NF-kB活性，无统计学差异(P>0．05)外，其余各组间两两比较，差异均有显著性(P<0．05)。哮喘组上皮细胞经1μg.ml^-1脂多糖及10μg.ml^-1氨茶碱共同培养2，4，24h。2h与4h处理组NF-kB活性与不加茶碱处理组相比，差异有显著性(P<0．05)。24h组与不加茶碱处理组相比差异无显著性(P>0．05)，但茶碱处理组内不同处理时间组间比较，差异无显著性(P>0．05)，哮喘大鼠气道上皮细胞中的基础NF-kB活性较对照组高。结论：茶碱类药物可抑制体外培养的大鼠气道上皮细胞中的NF-kB的活性，并可能呈浓度依赖性，而与作用时间无明显关系。

完成机构：武汉大学人民医院呼吸内科,武汉430060